好文分享 | PCR实验室环境监测及污染防治策略
前言
PCR检测方法具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点，因此被临床医生广为认可，已广泛应用于医院的临床诊断和各防疫检测部门的禽疫病诊断。其高灵敏度和特异性意味着极微量污染也可能影响结果。为防污染，PCR实验室需采取严格措施，包括优化设计、规范操作、加强环境监测。环境监测是预防污染的有效手段，通过监测空气质量、温湿度、物表等参数，可及时发现并排除潜在污染源。
1
PCR实验室主要污染源
PCR实验室污染可能由多种因素引起，包括人员操作不当、PCR试剂污染、样本容器污染、样本交叉污染、PCR扩增产物污染和质粒污染等。
2
PCR实验室进行环境监测的步骤
2.1 明确监测对象
PCR实验室各区域需进行定期监测。试剂准备区监测门把手、传递窗把手、离心机、桌面、工作台和移液器；样本制备间监测门把手、传递窗把手、离心机、桌面、安全柜和移液器；样本提取间监测门把手、传递窗把手、离心机、桌面、安全柜、移液器和提取仪；扩增间监测门把手、传递窗把手、桌面和扩增仪。每周对物体表面进行一次监测。
2.2 监测方法及频次
环境监测中，采集管和拭子是常用工具。采样管需高压灭菌，标记后加入2ml ddH2O，采样后与样本一同检测记录。拭子浸润保存液后涂抹物体表面，重复3次后放回管中，采样结果可混合保存。采样时机可为固定监测日或实验前，监测频次根据运营情况定，建议每周至少1次。每周抽检3台扩增仪和提取仪，确保每月全覆盖。
2.3 监测结果
记录监测结果，判断实验室污染情况。若污染，立即停止实验，进行消杀和清除污染源。
3
PCR实验室污染防治策略
3.1 分区管理
PCR实验室需分为试剂储存、样本制备、PCR扩增、产物分析间，防止交叉污染。各区域应有专用设备、耗材，遵循单向空气流动，配备高效空气过滤系统。
3.2 人员操作规范
实验室人员需专业培训考核合格，操作规范熟练。样本开盖前需离心，遵守单向流动原则，穿戴个人防护装备，进行适当清洁消毒。
3.3 实验室消毒工作
实验后立即对设备和环境消毒，包括台面、加样器、样本架、离心机等，用次氯酸钠和乙醇清洁，紫外灯照射，清洁消毒吸嘴和椅表面，确保破坏残留DNA。
3.4 设立空白和阳性对照
实验中应设立空白对照和阳性对照，用空白水进行环境监测，检测污染现象。
4
小结
PCR实验室污染来源多样，包括操作不当、设备污染、样本交叉污染等。环境监测是排除污染的关键措施。定期监测生物安全柜、移液器等表面，可及时发现污染，对预防污染至关重要。发现污染时，应立即停止实验，查找原因并清洁消除污染，直至排除后恢复实验。因此，建立环境监测和预防措施能有效发现和预防污染，确保临床报告准确性。
关于我们
南京贝思奥 (BIONCE) 生物科技有限公司成立于2020年，公司致力于基于重组病毒的基因治疗药物的研发、生产与质量控制，并研制具有自主知识产权的临床基因治疗药物。主要用于治疗眼科疾病、神经系统疾病、恶性肿瘤、罕见病等，打造基因治疗技术研发创新基地。
Merry Christmas
微信号丨BIONCE_BIOTECH
